La guerre du Viêt Nam vit pour la première fois l'hélicoptère prendre une place prépondérante dans le déroulement des opérations militaires. Le Huey, de par la variété des rôles qui lui furent confiés et son omniprésence, devint pratiquement un symbole de ce conflit. Les UH-1 de l'United States Army Aviation Branch ont effectué 9 713 762 heures de vol entre octobre 1966 et 1973.
Trois configurations principales furent utilisées :
Slick : Transport de troupes ou de cargo. Armement : une M60 de chaque côté du fuselage.
Gunship : Appui au sol ou escorte. Armement (variant selon le temps, les missions et les versions): deux mitrailleuses de 7,62 x 51 mm OTAN couplées en parallèle de chaque côté du fuselage, d'une tourelle lance-grenade placée sous le nez de l'appareil et de deux lance-roquettes triple de 70 mm. Le Huey Cobra (AH-1G) devait remplacer les gunships Huey, mais Bell ne put en produire suffisamment.
Medevac : Évacuation sanitaire.
Pendant la guerre, 3 305 UH-1 de tous types furent détruits par accidents ou du fait de l'ennemi.
La célèbre image du dernier hélicoptère quittant le toit de l'immeuble d'habitations où vécut le chef de station de la CIA marquant la fin de la guerre du Vietnam, fut un UH-1B d'Air America3.
Le dernier président de la République du Viêt Nam nommé trois jours avant la chute de Saïgon, Duong Van Minh, avait en sa possession personnelle pour ses nombreux déplacements un UH-1B, exposé aujourd'hui dans le palais de la réunification, à Ho-Chi-Minh-Ville.
